cAMP/cGMP(環(huán)磷酸腺苷/環(huán)磷酸鳥苷)是一種環(huán)狀核苷酸,以微量存在于動(dòng)植物細(xì)胞和微生物中。有人稱其為細(xì)胞內(nèi)的第二信使,而稱激素為“第一信使”。cAMP(或cGMP)由腺苷酸(或鳥苷酸)環(huán)化酶產(chǎn)生,而被磷酸二酯酶降解,因此激活腺苷酸(或鳥苷酸)環(huán)化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高細(xì)胞內(nèi)cAMP(或cGMP)的含量。研究發(fā)現(xiàn),cAMP(或cGMP)特異性磷酸二酯酶的抑制劑可用于人類疾病的治療。如cAMP的封閉劑,增強(qiáng)β腎上腺素能受體已被用于心率失調(diào)、高血壓、心肌梗死等心臟疾病;cAMP特異性磷酸二酯酶2/4的抑制劑正在進(jìn)行認(rèn)知增強(qiáng)方面的臨床測試;而cGMP特異性磷酸二酯酶類型5可用于治療ED等疾病。因此為篩選出腺苷酸(或鳥苷酸)環(huán)化酶激活劑或磷酸二酯酶抑制劑,需要一個(gè)高敏感度、特異性的、可重復(fù)的方案用于檢測cAMP(或cGMP)的濃度。目前商業(yè)化提供的一些cAMP(或cGMP) ELISA試劑盒使用的是非親和純化的cAMP(或cGMP)抗體,因此特異性不好。
TZYBIO的cAMP/ cGMPELISA試劑盒提供了一個(gè)靈敏的、通過直接競爭酶聯(lián)免疫法靈敏的檢測生物樣本內(nèi)cAMP(或cGMP)水平的方案。試劑盒采用重組Protein G包埋的96孔酶標(biāo)板以高效錨定親和純化的cAMP(或cGMP)多克隆抗體分子,保證了cAMP(或cGMP)多克隆抗體與酶標(biāo)板結(jié)合的強(qiáng)度和靈敏度。試劑盒內(nèi)提供的cAMP-HRP(或cGMP-HRP)偶聯(lián)物直接與待測樣本內(nèi)cAMP(或cGMP)競爭性的結(jié)合到酶標(biāo)板的cAMP(或cGMP)抗體上。孵育并清洗后,結(jié)合到酶標(biāo)板上的cAMP-HRP(或cGMP-HRP)偶聯(lián)物數(shù)量可以很方便的通過HRP顯色底物等試劑在OD450nm處讀取。這樣OD450 nm的數(shù)值與樣本內(nèi)cAMP(或cGMP)的含量呈負(fù)相關(guān)。基于cGMP標(biāo)準(zhǔn)品所得曲線,通過測得的OD值可以計(jì)算出樣品中cGMP的濃度,本試劑盒IC50(50% B/B0)約5 pmol/mL,檢測限約0.1 pmol/mL。下圖為TZYBIO的 cGMP ELISA Kit(貨號(hào)#TK0201)和 cAMP ELISA Kit(貨號(hào)#BK0202)試劑盒做做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線



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